核转录因子Nrf2与肺纤维化相关研究进展
2021.10.08 核转录因子Nrf2与肺纤维化相关研究进展
刘学1，2，刘骅漫3，张伟3
机体在氧化与抗氧化失衡的过程中产生大量活性氧(ＲeactiveOxygenSpecies，ＲOS)，本身ＲOS容易与蛋白质、核酸、脂质等大分子物质发生氧化反应造成细胞生物膜损伤及胞内氧化磷酸化障碍，此时，机体会启动相应的抗氧化蛋白，比如SOD、GSH等，以减轻氧化应激反应对细胞的损伤。研究证实，Nrf2－keap1－AＲE信号通路是目前机体最主要的内源性抗氧化信号通路［1］，核因子NF－E2相关因子(Nrf2)是细胞氧化应激通路中最重要转录因子，通过与抗氧化物反应元件(AntioxidantＲesponseElements，AＲE)相互作用，能够上调机体内多种抗氧化蛋白及Ⅱ相解毒酶的表达水平，清除体内氧化应激产生的自由基，从而维持细胞的氧化还原状态，相反，Nrf2缺失或激活障碍则会导致抗氧化酶减少，加重细胞的氧化应激的负效应，诱导某些氧化应激性纤维化疾病发病。
氧化应激是肺纤维化发生发展的重要病理机制已被证实，但尚无确切可推广的临床有效药物，面对目前的治疗“瓶颈”，提高机体对氧化应激的耐受能力或可成为解决临床肺纤维化治疗局限性的突破口。西医治疗主要是联用或单用糖皮质激素、免疫抑制及细胞毒等药物，大样本资料显示仅有不到1/3的患者病情能够得到改善，且由于需要长期应用以上药物，最终可伴随出现严重的不良反应。现就Nrf2－Keap1－AＲE信号通路及与肺纤维化研究进展做如下综述。
1 Nrf2－Keap1－AＲE信号通路的分子基础
Nrf2－Keap1－AＲE信号通路主要是通过以下途径发挥信号转导作用，首先是细胞内活化的Nrf2与Keap1解离，解离后的Nrf2进入细胞核，在胞核内与小Maf蛋白结合形成异二聚体，遂即与细胞核内的抗氧化反应元件AＲE序列结合，进而启动Ⅱ相解毒酶和抗氧化酶基因的转录表达。参与该途径的酶类主要包括:血红素氧合酶(HO－1)、CAT、GSTs、SOD、NADP(H)醌氧化还原酶(NQO1)等，均在抗氧化损伤中发挥至关重要的作用。
1.1Nrf2
Nrf2是属于转录因子CNC(cap’n’collar)家族中活力最强的转录调节因子［2］，在机体容易发生氧化应激的多种细胞广泛表达，比如持续暴露于外界环境的皮肤、肺脏、消化道等脏器的组织细胞，以及具有代谢和解毒功能的肝脏、肾脏等脏器的组织细胞。Nrf2是分子量为66－ku的一种蛋白，含有一个碱性亮氨酸拉链(b－ZIP)结构，其中包含7个结构域Neh(Nrf2－ECHhomology)，依次被命名为Neh1－Neh7。各结构域功能如下:(1)Nech1位于Nrf2的C端，其结构域b－ZIP与转录因子形成异二聚体，在细胞核内，Nrf2识别后与AＲE进行结合，启动靶基因的转录。另外，该结构域与泛素连接酶UbcM2作用可调控Nrf2的胞核转位和降解［3］。(2)Nech2结构域是调节Nrf2活性的主要功能域。以及DLG基序、ETGE基序两个结合位点，其中，Nech2区含有与Keap1双甘氨酸序列的结合区，促进Nrf2泛素化降解，维持Nrf2的表达量在一个较低水平［4］。(3)Nech3结构域位于羟基端，具有高度保守性，主要功能是维持Nrf2的转录活性。通过招募共激动剂染色质解螺旋酶DNA结合蛋白6(Chromodomain Helicase DNA binding protein6，CHD6)，上调Nrf2目标基因表达水平活化转录。(4)Nech4、Nech5结构域在下游基因的启动转录中起重要作用，与Keap1解离的Nrf2进入细胞核与AＲE结合后并不能立即启动下游目标基因的转录，只有通过Nech4、Nech5结构域与其他辅助蛋白如CＲEB结合蛋白等转录激活剂结合，才能启动转录功能。(5)Nech6结构域富含大量丝氨酸残基，与非依赖性负性调节Nrf2氧化还原有关［5］，其具体功能目前尚不明确。(6)Neh7结构域研究较少，与视黄酸X受体α结合可抑制Nrf2基因转录［6］。
1.2Keap1
Keap1为Kelch家族多区域阻遏蛋白，分子量为69kDa，主要功能是对Nrf2信号通路起负性调节作用。生理状态下，Keap1在胞浆中与Nrf2结合，使Nrf2不能发生跨核膜转运，抑制Nrf2活力。另外，Keap1还能够降解Nrf2的E3泛素连接酶，维持Nrf2地表达量。Keap1蛋白一级结构有5个结构域，N末端序列(NTＲ)、C末端序列(C－terminalＲegion，CTＲ)、BTB区、IVＲ区、DGＲ区，其中BTB区及IVＲ区是调节Keap1蛋白功能的主要结构域。BTB区(BroadComplex，Tramtrack，BricaBrac)与细胞骨架的肌动蛋白结合，主要功能是Keap1－Nrf2解离、阻止Ⅱ相解毒酶抗氧化基因转录有关;IVＲ区(InterveningＲegion)富含半胱氨酸，容易参与氧化还原反应，同时还参与泛素化连接酶形成，与Nrf2稳定性有关;DGＲ区(DoubleGlycineＲichedＲegion):该区的6个双链甘氨酸重复序列形成经典6片p螺旋，该结构上含有多个与特定蛋白结合的位点，比如有Keap1与胞浆肌动蛋白结合的位点、Keap1与Neh2区的结合位点等，能够影响Nrf2及信号通路转导活性。
1. 3AＲE
AＲE是细胞核内一个特异的DNA－启动子结合序列，它在生物体内广泛分布，是体内重要的保护性顺式应答元件。AＲE位于Ⅱ相解毒酶和抗氧化酶基因的5’端启动序列(5－GAGTCACAGTGAGTGGCAAAATT－3)，氧化剂或亲电性化合物激活Nrf2，Nrf2与抗氧化酶基因的5’端的AＲE结合，导致下游Ⅱ相解毒酶和抗氧化酶、抗炎症因子等多种蛋白酶表达，提高细胞的抗氧化和抗炎能力，维持细胞内环境稳态［7］。
2.Nrf2－Keap1－AＲE信号通路的激活
生理状态下，细胞内环境的氧化－还原态维持相对稳定状态，Nrf2与伴侣蛋白分子Keap1结合，且通过泛素蛋白酶途径持续降解，保持动态平衡状态，Nrf2主要存在于细胞质，与Keap1结合，处于非活性状态。当细胞被亲电子物质或氧化剂等攻击处于氧化应激状态时，Nrf2与Keap1解偶联后激活并发生跨膜转运入核，启动Nrf2－Keap1－AＲE信号通路下游抗氧化酶蛋白表达，发挥抗氧化的作用。因此，Nrf2－Keap1－AＲE信号通路的激活离不开Nrf2与Keap1解偶联以及Nrf2的扩膜转运。
2. 1Nrf2的激活机制
Nrf2的激活受多种机制调控，主要涉及Nrf2与Keap1的解偶联以及依赖于介导Nrf2稳定性的机制。
2.1.1Nrf2与Keap1解偶联机制
Nrf2的活性受Keap1蛋白调控，同源二聚体Keap1的两个DGＲ分别与Nrf2的Nech2结构域的DLG序列和ETGE序列结合将Nrf2限制在细胞质内，另外，Keap1还能调控Nrf2泛素化及蛋白酶不断降解Nrf2［8］，因此，非应激状态时，Nrf2主要存在于在细胞质中处于非游离及不断降解的非活性状态［2］。关于Nrf2与Keap1解离机制，主要可分为2种:(1)氧化应激时Keap1构象改变导致Nrf2与Keap1解离而活化Nrf2。亲电子物质或氧化剂直接作用于Keap1的两个半胱氨酸位点C273和C288，导致Keap1发生构象改变，二聚体Keap1的一个DGＲ与Nrf2结构域的DLG序列结合断开，导致Keap1与Nrf2解偶联，进入细胞核与小Maf蛋白结合形成异二聚体，与抗氧化反应元件AＲE序列识别并进行结合，进而启动受AＲE调控的Ⅱ相解毒酶和抗氧化酶基因的转录。同时，如果Nrf2－Keap1－Cul3复合物构型发生改变，不利于Nrf2泛素化和降解［9］。(2)某些蛋白激酶通路导致Nrf2的直接磷酸化促使Nrf2与Keap1分离而活化Nrf2［340］。多种蛋白激酶比如蛋白激酶C(ProteinKinaseC，PKC)、丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinases，MAPKs)和胰腺内质网激酶(PEＲK)等途径也可诱导Nrf2直接磷酸化，干扰细胞质内Nrf2－Keap1的相互作用，激活Nrf2/AＲE信号通路，特异性激酶抑制剂可以阻滞磷酸化激活Nrf2，但是具体机制尚未完全明确［10］。研究发现，Nrf2的Ser40是PKC磷酸化作用位点［11］，用谷氨酸替代Nrf2的Ser40位点可导致Nrf2磷酸化，使Nrf2在细胞核的表达增多。内质网非折叠蛋白的蓄积通过内质网定位的胰腺内质网激酶PEＲK直接磷酸化Nrf2来激活Nrf2［5］。当细胞内环境的氧化还原态恢复后，Nrf2与AＲE解离，由胞核返回胞浆，通过泛素化及蛋白降解，或负反馈调节，关闭Nrf2信号通路，维持低水平Nrf2表达。
2.1.2Nrf2稳定性机制
Nrf2稳定性与蛋白磷酸化有关。正常情况下，Keap1调控Nrf2泛素化及蛋白酶不断降解Nrf2，Nrf2主要存在细胞质中处于低浓度非活性状态。氧化应激时Nrf2的稳定性增强、表达量增加，当Nrf2发生磷酸化时，能减弱蛋白酶对Nrf2的识别，降低对Nrf2的泛素化和降解。研究发现，蛋白酶抑制剂对Nrf2作用敏感，能够降低对Nrf2的降解，增加其在细胞核的蓄积。蛋白酶体抑制剂作用于HepG2细胞后，通过免疫荧光法检测发现细胞核内Nrf2蛋白表达明显增加，同时Nrf2下游抗氧化基因γ－GCLmＲNA增加［12］。有关研究发现，Nrf2本身也可能含有氧化应激感受器，但目前无有力证据支持［13］。
2.1.3竞争性抑制
Nrf2在细胞质中，前胸腺素、ALZ50活化克隆蛋白、FAC1蛋白等活性蛋白，均可与Nrf2竞争性结合Keap1而影响其活化程度。Karapetian等［14］发现，前胸腺素α与Keap1直接特异性结合能力很强，远远超过与Nrf2结合的能力，导致Nrf2与Keap1分离而活化，通过质粒过表达及ＲNA沉默干涉技术实验发现，胞质内Nrf2进入细胞核的数量与前胸腺素α含量具有相关性;在细胞核里，Bach1具有跟Nrf2相同的CNC结构，可以竞争Nrf2与AＲE在细胞核的结合位点，Beach1通过抑制Nrf2下调AＲE下游基因表达。
2.2Nrf2跨核膜转运机制
氧化应激状态时，Keap1构象改变，Nrf2发生磷酸化，致使两者解离，Nrf2由胞质向胞核转运，细胞核内Nrf2明显增多，Nrf2跨核膜转运主要取决于NLS和NES之间的平衡。NLS是一种氨基酸序列，存在于细胞的许多蛋白质中并可介导蛋白质由细胞质向细胞核转运，其中核转运蛋白improtinKaryopherin和importing以及能量供应体ＲanGTP在Nrf2入核转运过程中发挥了重要的作用。NESTA结构主要由氧化物的类型决定，NESTA结构的失活可促使Nrf2的核转移。研究发现，MAPK、EＲK、JNK、P38信号通路的蛋白激酶可相互作用交叉调控增加Nrf2的核转位，Nrf2在JAK的催化下通过Tyr残基磷酸化胞浆到胞核的转位。
2.3Nrf2－Keap1－AＲE信号通路调节的下游抗氧化蛋白基因
Nrf2－Keap1－AＲE信号通路的重要性主要体现在该通路被激活后，通过一系列的逐级反应，调控下游多种保护性基因的转录表达以发挥强大的抗氧化保护作用，Nrf2/AＲE信号通路调控抗氧化蛋白主要包括Ⅱ相解毒酶、抗氧化蛋白类等，有增强组织抗氧化能力、抗炎、抗动脉硬化、抗凋亡、抗肿瘤、神经保护等作用［15］。其中，抗氧化蛋白可以用来维持体内氧化还原平衡状态，其作用主要是通过催化自由基转化和增加自由基排除来体现。
2.3.1血红素氧合酶1
血红素氧合酶1(HO－1)是血红素降解限速酶，在体内能够催化血红素生成胆红素、一氧化碳和铁离子。HO－1不仅可以阻止游离血红素参与氧化反应，而且机体的抗氧化、抗炎、抗凋亡、改善微循环等作用直接与HO－1及其酶解产物密切相关，是机体最重要的内源性保护体系之一［8］。实验研究发现，鹅掌菜酚通过增加Nrf2蛋白表达及核转位，减轻仓鼠肺成纤维细胞的氧化损伤，伴随可见HO－1表达增强，而应用Nrf2siＲNA之后，HO－1表达明显下降。通过对比观察野生型与Nrf2－/－SD大鼠肝脏缺血再灌注实验，发现当先予肝脏缺血60min处理后再予灌注，野生型大鼠比Nrf2－/－大鼠出现明显的组织保护作用。野生型大鼠肝脏保护细胞被激活，Nrf2由细胞质向细胞核转移增加，肝组织中Nrf2、HO－1蛋白及mＲNA表达水平明显提高，而Nrf2－/－大鼠则没有出现以上保护作用。以上结果提示HO－1的表达受Nrf2调控。
2.3.2GSH
GSH作为体内重要的抗氧化蛋白类，可与自
由基结合将其排出体外，减轻氧化应激对细胞蛋白质、脂质、DNA损伤。细胞内GSH表达主要由谷胱甘肽合成酶、谷胱甘肽还原酶、谷氨酸半胱氨酸连接酶以及部分谷胱甘肽S转移酶调节，这些调节酶均受Nrf2的转录调节。Li等［16］研究发现，NＲK－52E细胞转染Nrf2质粒后，再予细胞以氧化损伤后，NＲK－52E细胞内GSH表达明显高于对照组，细胞存活率升高，相反，应用基因沉默技术敲除Nrf2后，NＲK－52E细胞GSH表达明显低于对照组，细胞存活率下降。Lu等［17］研究发现，将Nrf2+/+小鼠喂食吡唑后，肝脏谷胱甘肽S转移酶(GST)蛋白表达明显上调，而Nrf2－/–小鼠改变不明显，明显可见肝脏的氧化应激损伤。
2.3.3SOD
SOD是人体最重要的抗氧化酶，其中铜锌SOD主要存在细胞质中，锰SOD主要存在线粒体中。Ｒubi-olo研究发现，先予大鼠肝脏原代细胞浓度为50μmol/L白藜芦醇共培养48h后，以浓度500μmol/LH2O2刺激24h，可见在白藜芦醇治疗组SOD活性最高，Nrf2的mＲNA水平是对照组1.4倍，免疫荧光发现治疗组的细胞质和细胞核中均有
Nrf2，对照组Nrf2只存在于细胞浆［18］。
2. 3.4醌氧化还原酶1
醌奉旨还原酶1(NQO1)属于Ⅱ相解毒酶中的一种，以NAD(P)H为受体，催化醌类及其衍生物发生双电子还原反应，调节细胞内物质维持氧化还原稳态，其催化过程中自由基等氧化产物的形成，对各类代谢原因引起的氧化应激损伤均具有保护作用。通过染色体免疫沉淀分析法发现，在细胞核内，Nrf2与NQO1基因的AＲE序列相结合并激活NQO1目标蛋白的表达。研究发现，冠状动脉内皮细胞用高糖培养后胞内Nrf2转录水平明显提高，并上调NQO1表达水平，而对于Nrf2基因敲除或者Keap1过表达的细胞则无明显改变。研究发现，给予1%tBHQ(w/w)喂养小鼠4周后，在减轻小鼠大脑缺血再灌注引起的脑皮质损伤同时，还可增强小鼠皮质的NQO1蛋白的表达，相反，在Nrf2－/－小鼠中变化不显著［19］。
3.Nrf2诱导剂
研究发现，Nrf2在氧化应激中有重要的保护作用，被视为一种好蛋白，保护人类调整氧化/抗氧化失衡，在许多疾病发病中扮演重要角色，如慢性阻塞性肺疾病、肺纤维化、糖尿病、中枢神经系统疾病、肿瘤等。因此，探索Nrf2为研究靶点的药物在疾病的治疗作用成为研究热点，可以诱导Nrf2依赖的抗氧化应答，保护细胞抵御外来毒物，可指导临床用药及新药研发。
3. 1植物来源Nrf2诱导剂
许多天然植物具有较强的抗氧化作用，其中抗氧化作用比较强的成分有莱菔硫烷、姜黄素、白藜芦醇、咖啡酸苯乙酯、番茄红素等等。姜黄素、咖啡酸苯乙酯等主要通过促进Keap1－Nrf2解离活化Nrf2发挥抗氧化作用［20］。白藜芦醇、表儿茶素酸酯、槲皮素等主要通过酚羟基清除自由基起到抗氧化作用［21］。莱菔硫烷抗氧化作用机制主要是通过激活Nrf2信号通路诱导Ⅱ相解毒酶表达。
3. 2化学合成Nrf2诱导剂
某些化学合成的药品，如富马酸二甲酯、PMX－290、甲基巴多索隆也是Nrf2强诱导剂［22］。研究发现，甲基巴多索隆可以诱导Nrf2/AEＲ信号通路Nrf2核易位，促进Ⅱ相解毒酶表达，抑制NF－KB活性等发挥抗氧化作用，曾用于治疗糖尿病肾病Ⅲ期临床实验，但因心肾功能毒副作用而终止。Wong等［23］研究发现，化合物PXM－290通过加强Keap1和Clu3结合抑制Nrf2泛素化，增加Nrf2表达量及转录活性。富马酸二甲酯(BG－12)可以治疗多发性硬化症，其作用机制主要是抑制NF－kB活性、促进活化的T淋巴细胞凋亡、增加细胞因子IL－4、IL－5的释放，激动Nrf2以增加NQO1、HO－1以及谷胱甘肽的表达水平等。
4.Nrf2/AＲE信号通路调控肺纤维化的作用机制
4. 1抗应激
Morito等［24］认为Nrf2/AＲE信号通路对肺纤维化的保护机制主要是提高细胞内AＲE敏感的抗氧化酶表达水平，观察发现IPF患者增生的肺泡上皮细胞中红系衍生核因子2相关因子2(Nrf2)的显著增加，Nrf2能够与AＲE结合，启动AＲE调控的抗氧化酶基因表达，如血红素加氧酶－1(HO－1)。Petrache等［25］观察发现，在原发性肺纤维化患者中，Nrf2主要在Ⅱ型肺泡细胞表达，其表达量是正常肺组织的5倍，随着病程进展，抗氧化酶表达持续升高，在第16天表达最高，说明两者具有相关性，并且研究发现其对实验性肺纤维化的保护作用显著。通过体内动物及细胞实验研究，证实Nrf2/AＲE信号通路通过上调下游HO－1、NQO1等抗氧化物的表达，调节体内氧化应激水平，减少细胞外基质(如胶原)的合成，抑制成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞，下调α－SMA的表达，降低肺纤维化大鼠的死亡率，最终起到抗肺纤维化的作用。相关研究证实，Nrf2的缺乏使抗氧化酶的水平下降，导致小鼠模型对多种肺病易感［26］。Kikuchi等［27］认为，在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型中，肺组织纤维化病理评分及氧化应激指标8－ohDG明显升高，Nrf2通过调节Th1/Th2平衡向Th2偏移，降低小鼠体内氧化应激水平，从而抑制肺纤维化的发生。这也就进一步证实了Nrf2/AＲE通路的对肺纤维化确实有保护作用。
4.2抗凋亡
研究发现，肺纤维化始于肺泡，肺泡上皮细胞的凋亡在肺纤维化发生发展中发挥重要作用［28］。Nrf2调节细胞凋亡主要通过两种途径:其一，Nrf2过表达直接调节Fas途径诱导细胞凋亡的敏感性［29］。其二，Nrf2过表达提高GSH水平间接调节细胞对凋亡信号的敏感性。相关实验证实，缺少Nrf2可以使肺泡上皮细胞增殖不良，并且对氧化剂诱导的细胞凋亡更敏感，补充谷胱甘肽(GSH)可对抗Nrf2缺乏造成的病理改变，并且可抑制Nrf2缺乏所导致的［30］
5.中药或中药单体基于Nrf2/AＲE信号通路调节氧化/抗氧化失衡治疗肺纤维化
目前国内外基于Nrf2/AＲE信号通路包括该通路下游的单一靶点转化因子或核蛋白调控氧化/抗氧化失衡作为肺纤维化发病机理探讨药物治疗效果的文章较多，如刘理静等［33］观察大黄素对肺纤维化大鼠的保护作用及部分机制研究，测定肺组织测定肺组织羟脯氨酸(HYP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH－Px)、过氧化氢酶(CAT)含量，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子－α(TNF－α)、白介素(IL)－6、IL－7浓度，通过Wseternblot分析肺组织中Kelch样ECH联合蛋白(Keap1)、NF－E2相关因子2(Nrf2)、核因子－kB(NF－kB)p65表达，结果证明大黄素可能通过增强抗氧化能力及抑制炎症反应对肺纤维化大鼠产生保护作用，启示大黄素能够激活Nrf2从而发挥抗脂质过氧化损伤作用，通过阻碍NF－kB核转位抑制肺纤维化大鼠促炎因子的分泌。罗庆凯等［34］观察苦参碱对博来霉素诱导肺纤维化大鼠中Nrf2表达的影响，采用免疫组化法(SP)分析每组不同时间点肺组织中Nrf2蛋白水平，ＲT－PCＲ检测大鼠肺组织中Nrf2m－ＲNA的表达，结果证明Nrf2通过抑制早期的氧化应激反应，对博来霉素导致的大鼠肺间质纤维化表现出一定防治作用，苦参碱通过早期上调Nrf2表达调节氧化应激抑制大鼠模型的肺纤维化进展。申永春等［35］探讨槲皮素对香烟暴露大鼠肺组织氧化应激和Nrf2表达的影响，采用HE染色观察肺部形态学变化，匀浆肺组织检测谷胱甘肽和丙二醛的变化，westernblot法检测Nrf2的表达，结果显示槲皮素能降低香烟暴露导致大鼠肺组织的高氧化应激状态，下调熏烟诱导的Nrf2高表达。孙万良等［36］研究EGCG炎症因子表达 。研究发现，博来霉素诱导的肺纤维化大鼠中HO－1的过表达，可减轻肺内ECM的沉积，降低肺泡上皮细胞的凋亡，减缓肺纤维化的发展。另外，HO－1本身的过表达及其即其代谢产物一氧化碳均可阻止TNF－α介导的肺成纤维细胞的凋亡过程，一氧化碳靶酶可去除HO－1对肺组织细胞凋亡的抑制作用。
4.3抗感染对肺微血管内皮细胞应用
siＲNA技术干预Nrf2的表达后，再予过氧化氢处理可出现明显的炎症损伤及氧化应激反应，其损伤幅度与Nrf2被抑制程度相关，证明在细胞的氧化损伤和炎症损伤中Nrf2发挥重要的保护作用［31］。15－脱氧－(12，14)－前列腺素J(2)［15－deoxy－delta(12，14)－prostaglandinJ(2)15d－PGJ2］与Keap1相互作用可激活Nrf2的表达，属于Nrf2的内源性诱导剂。Nrf2基因敲除小鼠表现出较野生型小鼠更明显的急性肺损伤，15d_PGJ2通过激活Nrf2途径避免急性肺损伤。Cho等［32］研究发现，博莱霉素导致Nrf2－/－小鼠的肺间质水肿及胶原蛋白沉积及肺组织纤维细胞增殖明显，肺泡灌洗液中可见大量炎性因子，提示靶向敲除Nrf2可极大提高小鼠对博莱霉素诱导的肺组织炎症和纤维化的易感性。
对大鼠放射性肺损伤的防治效果及作用机制，发现EGCG可
显著降低肺组织纤维化评分;显著降低血清MDA水平，增强血清T－SOD活力，上调胞内Nrf－2、NQO－1、HO－1的表达，结果提示EGCG通过激活Nrf2/AＲE信号通路增加下游抗氧化酶表达以提高机体抗氧化能力，可明显减轻放射性肺损伤及改善纤维化病变。
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